鐘醫當然不會讓這種氣徹底的下去。

他開口說話。

“我當然知道大家的震驚，也知道大家的擔心和憂慮。所以……我們那實驗來說話吧。”鐘醫說道。

“實驗過程。”楊光迫不及待地說道。

鐘醫當然不會讓楊光久等。

“蒲地藍消炎口服液是由蒲公英、板藍根、苦地丁、黃芩組成，具有清熱解毒、消腫利咽的功效，適用于癤腫、腮腺炎、咽炎、扁桃體炎。

我們在臨床上常用于治療急性上呼吸道感染，效果良好。

當然，大家都沒有什么實際例子。

現在，我們有顯示蒲地藍消炎口服液對脂多糖誘導的大鼠急性肺炎具有保護作用，可減輕大鼠急性肺炎模型中肺組織的炎癥反應，對肺組織的病理損傷有修復作用。

我們研究發現，肺部感染性疾病誘發的炎癥，與三羧酸循環等能量代謝過程緊密相關。

代謝組學是對生物體內代謝物進行定量分析，并尋找代謝物與生理病理變化相對關系的研究方式。

靶向代謝組學通過對生物樣品中目標的低豐度代謝產物進行定量，能夠更準確地反映生物系統中代謝分子的濃度變化，是代謝組學當前研究的新熱點。

蒲地藍消炎口服液在臨床廣泛運用于呼吸系統疾病的防治，療效顯著，基礎研究結果顯示，蒲地藍消炎口服液能夠顯著改善脂多糖誘導小鼠急性肺炎，但尚未有對能量代謝方面的研究。

所以，我們做了整個研究，本研究以脂多糖誘導ICR小鼠急性肺炎模型為研究對象，以靶向代謝組學為技術手段。

用這個研究來探討蒲地藍消炎口服液對脂多糖誘導的急性肺炎小鼠糖酵解和三羧酸循環等機體能量代謝的影響及其可能的作用機制。

為后續開展蒲地藍消炎口服液抗急性肺炎的作用機制研究與臨床用藥提供方向和依據。”

見眾人豎起耳朵在聽，鐘醫就沒有賣關子了。

他說道：“首先，我們用到的儀器有：小時YQ-3110微量振蕩器渦旋混勻器，低速臺式離心機TDL-80-2B。

電熱恒溫水浴鍋，超純水系統，型分析天平(d=0.01毫克)，Kh-500B型超聲清洗器，來自昆山市超聲儀器有限公司。

TSQ8000型三重四級桿氣相色譜質譜聯用儀，色譜柱多功能酶標儀。

所用的藥物有，我們自己生產的蒲地藍消炎口服液，。

拜阿司匹林。乙醚。甲醇。1，2-13C2-肉豆蔻酸、吡啶、N，O-雙(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)、甲氧基胺鹽酸鹽。正己烷。

氯化鈉。標準品:丙酮酸、乳酸、葡萄糖、3-磷酸甘油酸、琥珀酸蘋果酸、富馬酸、檸檬酸和α-酮戊二酸。”

“方法那就更加簡單了。”

“首先，動物實驗及樣本收集36只ICR小鼠，體質量(20±5)g，雌雄各半，按體質量隨機分為6組，每組6只。

也就是對照組、模型組、拜阿司匹林組(200毫克千克)、蒲地藍消炎口服液低劑量組(1.3毫升千克)、蒲地藍消炎口服液中劑量組(3.9毫升千克)、蒲地藍消炎口服液高劑量組(11.7毫升千克)。

拜阿司匹林組和蒲地藍消炎口服液各劑量組給予相應劑量藥物，每日1次，連續5d，空白組和模型組灌胃等體積的生理鹽水。

末次給藥1小時后，除空白組外，其余各組構建急性肺炎模型。

即使用異氟烷麻醉小鼠后，用脂多糖(2毫克千克)給小鼠滴鼻造模，空白組滴入相同體積生理鹽水，造模12小時后進行取材。

各組小鼠摘眼球取血，解剖并取左肺中葉用百分之10甲醛溶液固定，石蠟包埋后進行小時E染色，分裝部分血清用于檢測IL-10、TNF-α和NF-κB的含量，剩余血清置于-80攝氏度保存，進行后續代謝組學檢測。”

鐘醫喘了一口氣，繼續說道。

“其次，是溶液的配制。

精密稱取丙酮酸、乳酸、琥珀酸、富馬酸、蘋果酸、α-酮戊二酸、磷酸烯醇式丙酮酸、順式烏頭酸、3-磷酸甘油酸、檸檬酸、異檸檬酸和葡萄糖對照品，溶解成1毫克毫升的對照品儲備液。

精密量取上述對照品儲備液分別稀釋成4、120、16、0.1、0.5、1、0.02、0.01、0.04、2.5、0.16、240微克毫升的對照品溶液，4攝氏度保存。

精密稱取1，肉豆蔻酸適量置于10毫升容量瓶中，加甲醇稀釋溶解，配制成1毫克毫升的內標儲備液，4攝氏度保存。

吸取內標儲備液適量，加入甲醇稀釋成濃度為5微克毫升的內標工作液。

然后是樣本前處理及衍生化反應。

取50微升血清，加入200微升預冷的含1，2-13C2-肉豆蔻酸(5微克毫升)的甲醇溶液，渦旋3分鐘，4攝氏度離心10分鐘(14000r分鐘)。

同時，取上清液100微升置30攝氏度真空濃縮儀揮干2小時，加10毫克毫升甲氧胺吡啶30微升，渦旋5分鐘，30攝氏度振蕩1.5小時。

繼續加入30微升BSTFA，渦旋5分鐘，37攝氏度振蕩半小時，最后將樣品4攝氏度離心10分鐘，14000r分鐘，取上清進樣。

最后，分析條件色譜條件:載氣為氦氣，流速1.2毫升分鐘，采用分流進樣，分流流速為24.0毫升分鐘，分流比為20∶1。

色譜柱:TG-5MS30m×0.25mm×0.25μm，進樣口溫度300攝氏度。

升溫程序:60攝氏度保持1分鐘，以20攝氏度分鐘升至320攝氏度，保持5分鐘。

質譜條件:EI電離源，電子能量為70eV，離子源溫度為300攝氏度，傳輸線溫度為300攝氏度。溶劑峰延遲時間為3.8分鐘。

采用全掃描模式，掃描范圍mz50~500。

各代謝物靶向定量測定采用選擇反應監測(SRM)模式，碰撞氣為高純氬氣(99.999%)。

質譜參數優化吸取一定量的各代謝物的儲備液和內標儲備液進行混合，用甲醇稀釋并揮干，采用衍生化條件進行衍生化并進樣，采用全掃模式，對代謝物進行測定，確定各代謝物及內標的出峰時間。

然后，我們再采用TSQ8000的AutoSRM分析模式自動優化質譜儀分析參數，優化后的各物質參數是……”

“是什么？”楊光好奇又迫切地問道。

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